【佳學基因檢測】波羅的海肌陣孿性癲癇基因檢測
遺傳病、罕見病基因檢測
波羅的海肌陣孿性癲癇是一種以刺激誘發(fā)的肌陣攣和癲癇發(fā)作為特征的進行性肌陣攣性癲癇。本病為常染色體隱性遺傳病,CSTB基因編碼胱抑素 B 的半胱氨酸蛋白酶抑制劑,是通過基因解碼已經(jīng)明確的與波羅的海肌陣孿性癲癇相關的基因。盡管波羅的海肌陣孿性癲癇在歐洲波羅的海地區(qū)和地中海地區(qū)的患病率較高,但在世界范圍內(nèi)偶爾會診斷出散發(fā)病例。佳學基因檢測報告中描述的患者僅顯示 62 個十二聚體重復的異常增大的限制性片段,證實了波羅的海肌陣孿性癲癇,這是從她的父親和母親那里遺傳的,他們攜帶異常增大的限制性片段和具有正常大小片段,是致病基因突變的雜合子形式。
波羅的海肌陣孿性癲癇基因檢測
進行性肌陣攣性癲癇, Unverricht-Lundborg病, Southern blot,波羅的海肌陣攣性癲癇、波羅的海肌陣攣、EPM1、Lundborg-Unverricht綜合征、地中海肌陣攣性癲癇、Unverricht 和 Lundborg 的肌陣攣性癲癇、PME、進行性肌陣攣性癲癇、進行性肌陣攣性癲癇 1型、ULD、Unverricht-Lundborg綜合征。
波羅的海肌陣孿性癲癇基因檢測介紹:
波羅的海肌陣孿性癲癇(EPM1, OMIM 254800) 是“賊純粹”的類型,也是賊常見的進行性肌陣攣性癲癇 (PME)。它的特征是肌陣攣抽搐和全身性強直陣攣發(fā)作 (GTCS) 的癥狀,這些癥狀由光刺激或觸摸刺激引起,通常發(fā)生在 6-16 歲之間。這種疾病是一種常染色體隱性遺傳病,編碼半胱氨酸蛋白酶抑制劑胱抑素 B 的CSTB基因是致病基因鑒定基因解碼已經(jīng)明確的與波羅的海肌陣孿性癲癇 相關的基因。 CSTB啟動子區(qū)域的 12 核苷酸十二聚體重復 (5'-CCC-CGC-CCC-GCG-3') 擴展占全球約 90% 的病例和芬蘭 99% 的 EPM1 病例。溶酶體連接的喪失和 CSTB 的內(nèi)源性神經(jīng)保護作用被認為是該疾病的主要病理機制。在這里,我們報告了一位通過 Southern 印跡分析診斷為波羅的海肌陣孿性癲癇 的患者及其家人。這是韓國首例基因確認的波羅的海肌陣孿性癲癇 病例。這項研究得到了 Severance 醫(yī)院機構(gòu)審查委員會的批準。
波羅的海肌陣孿性癲癇基因檢測案例
一名 20 歲的女性因無法控制的手顫和癲癇發(fā)作就診?;颊叩膰a(chǎn)期和嬰兒期正常,早期發(fā)育過程的各個重要節(jié)點正常。她在 10 歲時出現(xiàn)全身肌陣攣運動。肌陣攣運動逐漸加重,雙上肢受累更嚴重。它們每天都頻繁發(fā)生,在入睡和醒來時更嚴重,關燈后它們的嚴重程度會降低。這些疾病狀態(tài)被突然的動比如站起來作觸發(fā)。此外,雙手顫抖(小幅抽搐)持續(xù)發(fā)生。當手靠近目標時,它們的嚴重程度會增加;因此,詳細的手部動作,例如操作手機時,是很困難的。另外,她從 13 歲起就因為引發(fā)肌陣攣運動而無法跑步。構(gòu)音障礙言語和步態(tài)障礙是在那個時候被發(fā)現(xiàn)的,并逐漸加重。她從 10 歲起就患有輕度智力障礙。15歲時進行的神經(jīng)心理學測試(韋克斯勒兒童智力量表-III)結(jié)果顯示輕度智力低下[全面智商(IQ)=65,言語智商=61,表現(xiàn)智商=75] . 此外,她表現(xiàn)出情感責任。在肌陣攣發(fā)生半年后,新穎出現(xiàn)一系列肌陣攣運動后的 GTCS。GTCS 主要由強光或情緒壓力引起,每周發(fā)生一次。那時,她開始接受抗癲癇藥物(AEDs)的治療。她的發(fā)作,包括肌陣攣運動和 GTCS,在奧卡西平、卡馬西平和拉莫三嗪治療后加重,在丙戊酸治療后顯著改善,尤其是在 GTCS 中。GTCS 的頻率減少到每年三到四次。
20歲時因GTCS控制加重(每月2次)入院。她曾接受左乙拉西坦(2000 毫克/天)、丙戊酸(500 毫克/天)、氯硝西泮(0.75 毫克/天)、巴氯芬(20 毫克/天)和勞拉西泮(1.5 毫克/天)治療。在神經(jīng)系統(tǒng)檢查中,觀察到雙手幾乎連續(xù)的顫抖運動。間歇性地發(fā)生相對大幅度的肌陣攣運動,特別是在突然移動時,并且還會因手臂伸展和手部伸展而引起。此外,她在串聯(lián)步態(tài)時表現(xiàn)出輕度構(gòu)音障礙、畸形肢體共濟失調(diào)和軀干共濟失調(diào)。患者 15 歲的姐姐認知正常,無神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。她的父親在 30 多歲時頭部外傷后經(jīng)歷過幾次癲癇發(fā)作。服用 AED 三年后,癲癇發(fā)作不再發(fā)展。而且,這個家族沒有其他國家的祖先。其他家族史無異常(圖1).
圖1: 患者的家譜(箭頭)。她的父親在 30 多歲的一場車禍中頭部受傷后接受了癥狀性癲癇發(fā)作治療。其他家族史無異常。
進行了連續(xù)視頻腦電圖 (EEG)。盡管肌陣攣運動(包括幾乎連續(xù)的、小振幅的抽動)并未與 EEG 放電時間鎖定,但 EEG 顯示間歇性全身尖波,后向加重。腦電圖背景節(jié)律正常,10 赫茲后部主導節(jié)律調(diào)節(jié)良好。光刺激不能引起電氣和臨床癲癇發(fā)作。腦磁共振成像和磁共振波譜未見異常。體感誘發(fā)電位和視覺誘發(fā)電位測試顯示正常的潛伏期、形狀和振幅。
在獲得知情同意后,通過 Southern 印跡分析對CSTB基因相關的十二聚體重復擴增進行分析。根據(jù)試劑盒說明書,使用 Wizard Genomic DNA 純化試劑盒從外周血白細胞中提取基因組 DNA。Southern 印跡分析在合作實驗室進行。患者僅顯示 62 個十二聚體重復的異常增大的限制性片段,證實了波羅的海肌陣孿性癲癇,這是從她的父親和母親那里遺傳的,他們攜帶異常增大的限制性片段作為具有正常大小片段的雜合子(圖 2). 她的姐姐也是雜合子,攜帶擴增片段作為攜帶者。
圖 2:Southern 印跡分析顯示患者體內(nèi)有擴大的限制性片段。陽性對照顯示擴大的片段,其擴大的大小分別為 39 個十二聚體重復和 81 個十二聚體重復,陰性對照顯示具有六個重復的正常片段。患者表現(xiàn)出具有 62 次重復的純合擴展 CSTB 片段,而她的父母和姐妹是具有雜合擴展 CSTB 片段的攜帶者。
合作醫(yī)院更換了 AED 以控制癲癇發(fā)作。停用氯硝西泮、巴氯芬和勞拉西泮后,患者接受丙戊酸(1250 mg/天)、左乙拉西坦(2000 mg/天)、氯巴占(10 mg/天)和唑尼沙胺(300 mg/天)治療。GTCS 在接下來的 9 個月內(nèi)沒有反復。此外,她雙手的小振幅抽動大大減少。
波羅的海肌陣孿性癲癇基因檢測分析
本患者的臨床表現(xiàn)與多種病因相關的 PME 相符。波羅的海肌陣孿性癲癇的癥狀比其他 PME 更輕?;颊呓?jīng)歷了逐漸惡化但輕微的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀,并保留了正常的 EEG 背景活動。因此,本例患者的這些臨床特征和病程被認為是ULD的典型臨床表現(xiàn)。如果認知或視覺癥狀出現(xiàn)嚴重進展,則應懷疑其他形式的 PME,例如伴有參差不齊的紅色纖維的肌陣攣性癲癇、神經(jīng)元蠟樣脂褐質(zhì)沉著癥、Lafora 病和唾液酸沉積癥。賊近的研究表明,更長的CSTB擴增突變對波羅的海肌陣孿性癲癇 的發(fā)病年齡、肌陣攣嚴重程度和皮質(zhì)神經(jīng)生理學具有調(diào)節(jié)作用。異常的CSTB基因相關十二聚體重復擴增通過 Southern 印跡得到證實,從而診斷出波羅的海肌陣孿性癲癇。CSTB基因的正常等位基因包含 2 到 3 個十二聚體重復和超過 30 個重復的全外顯等位基因。有效擴展的等位基因的大小和十二聚體重復區(qū)域中富含 GC 的序列使傳統(tǒng) PCR 極其困難,需要進行費力的 Southern 印跡分析。未來需要開發(fā)更方便的診斷測試(十二聚體重復分析方法,如重復PCR分析)。
雖然波羅的海肌陣孿性癲癇在地中海和芬蘭的流行率很高,但在世界范圍內(nèi),包括日本在內(nèi),已經(jīng)診斷出零星病例。然而,由于分子診斷技術的可用性各不相同,而且僅憑臨床癥狀很難診斷波羅的海肌陣孿性癲癇,因此在低流行地區(qū)仍缺乏對波羅的海肌陣孿性癲癇 的認識。據(jù)《人體基因序列變化與人體疾病表征》所知,對于頑固性肌陣攣或肌陣攣性癲癇患者,尤其是 6 歲以后發(fā)病的患者,CSTB分析使用 Southern 印跡分析的基因?qū)⒂兄诖_定該綜合征。選擇合適的抗癲癇藥物對于波羅的海肌陣孿性癲癇的治療非常重要。正如我們患者所見,卡馬西平、奧卡西平和拉莫三嗪可能反而加重肌陣攣。逆藥效學效應被認為是肌陣攣發(fā)作加重的主要機制。