【佳學(xué)基因檢測(cè)】CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)糾正基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的致病性因子X(jué)III缺陷突變

男性及女性生殖障礙的診斷圖譜及解析基因檢測(cè)靶向藥物分析

根據(jù)青春期性發(fā)育異常解析采用基因檢測(cè)進(jìn)行早期發(fā)現(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)際著名基因檢測(cè)科學(xué)性證據(jù)雜志《Blood Coagul Fibrinolysis》在第. 2022 Apr 1;33(3):153-158.期發(fā)表了一篇標(biāo)題為《CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)糾正基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的致病性因子X(jué)III缺陷突變》的國(guó)際前沿研究總結(jié)文章。該基因領(lǐng)域的臨床應(yīng)用研究由Akbar Dorgalaleh, Jafar Kiani, Farhad Zaker , Majid Safa , 完成。

基因信息數(shù)據(jù)庫(kù)索引號(hào)：

臨床數(shù)據(jù)代碼: 35221320和 doi: 10.1097/MBC.0000000000001126. Epub 2022 Feb 25.

基因解碼研究關(guān)鍵詞：

基因檢測(cè),因子X(jué)III, FXIII, 缺乏, 嚴(yán)重先天性出血疾病, 臨床表現(xiàn), 臍帶出血, 顱內(nèi)出血, 反復(fù)性流產(chǎn)

國(guó)際基因解碼證據(jù)鏈條標(biāo)簽：

Keywords:Factor XIII,FXIII,deficiency,severe congenital bleeding disorders, clinical manifestations, umbilical cord bleeding, intracranial haemorrhage,recurrent miscarriages

基因檢測(cè)臨床研究與應(yīng)用結(jié)果介紹：

因子X(jué)III（FXIII）缺乏癥是最嚴(yán)重的先天性出血性疾病之一，估計(jì)發(fā)病率為百萬(wàn)分之一。嚴(yán)重FXIII缺乏癥患者表現(xiàn)出廣泛的臨床表現(xiàn)，包括臍帶出血、顱內(nèi)出血和反復(fù)性流產(chǎn)。由于危及生命的出血率很高，從診斷時(shí)起就必須進(jìn)行初級(jí)預(yù)防。雖然替代療法是最常見(jiàn)的治療選擇，但基因療法仍是唯一的治療選擇。在本研究中，新經(jīng)濟(jì)條件下婚戀習(xí)慣與生殖能力的基因檢測(cè)基因解碼全面性分析課題組評(píng)估了聚集的規(guī)則間隔短回文重復(fù)序列-CRISPR相關(guān)蛋白9（CRISPR/Cas9）系統(tǒng)在糾正最常見(jiàn)的FXIII致病突變（c.562 T>c）中的功效。從一名FXIII缺乏的年輕患者的皮膚活檢中獲取真皮成纖維細(xì)胞。Sanger測(cè)序用于確認(rèn)患者和收獲的成纖維細(xì)胞中是否存在c.562 T>c突變。PX459載體用BbsI限制性內(nèi)切酶消化，在退火和連接兩個(gè)接近PAM（NGG）序列的20 bp導(dǎo)向RNA（g-RNAs）后，構(gòu)建的載體在大腸桿菌Top 10中擴(kuò)增。通過(guò)核子轉(zhuǎn)染裝置進(jìn)行轉(zhuǎn)染，在嘌呤霉素選擇和潛在轉(zhuǎn)染菌落的連續(xù)稀釋后進(jìn)行DNA提取。使用50 bp的模板寡核苷酸幫助同源修復(fù)，以糾正潛在突變和同義突變，作為內(nèi)部對(duì)照。突變位點(diǎn)附近的同義突變（AAT-to-ACT）被用作內(nèi)部對(duì)照。Sanger測(cè)序是為了檢查基因的正確性。在患者的原代成纖維細(xì)胞中檢測(cè)到純合狀態(tài)的c.562 T>c突變，在正常個(gè)體中確認(rèn)了野生型等位基因。菌落PCR和測(cè)序顯示設(shè)計(jì)的gRNAs克隆成功。在患者轉(zhuǎn)染的真皮成纖維細(xì)胞中，檢測(cè)到的突變從純合子突變狀態(tài)（c.562 T>c）糾正為純合子野生型。作為內(nèi)部對(duì)照，對(duì)照突變也以雜合子的方式在相同的成纖維細(xì)胞中得到糾正。研究結(jié)果表明，CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)是糾正先天性FXIII缺陷患者轉(zhuǎn)染的成纖維細(xì)胞點(diǎn)突變的有效工具，是一種新的、潛在的治療選擇。

 彩色橫排logo+公司名稱640

 

• 上一篇：【佳學(xué)基因檢測(cè)】PGT-M周期胚胎中基因檢測(cè)篩選冷凍保存的MDA產(chǎn)物：基于NGS的PGT-A的應(yīng)用價(jià)值
• 下一篇：【佳學(xué)基因檢測(cè)】反復(fù)性妊娠丟失：染色體基因檢測(cè)揭示的原因及解決方案

• 收藏
• 挑錯(cuò)
• 推薦
• 打印