【佳學(xué)基因檢測】黏脂貯積癥Ⅱ型基因解碼基因檢測

黏脂貯積癥Ⅱ型基因檢測是對英文疾病名稱為mucopolysaccharidosis  type Ⅱ的疾病進(jìn)行的各類基因檢測的總稱。該病又稱為包涵體細(xì)胞病(inclusion cell disease)，簡稱I-cell病。其臨床特征更像Hurler綜合征，表現(xiàn)為出生時就有明顯的臨床和X線異常，反應(yīng)遲鈍，但無黏多糖尿癥。皮膚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)有大量粗大細(xì)胞質(zhì)包涵體。

出生時即可發(fā)現(xiàn)許多異常，如先天性髖關(guān)節(jié)脫位、男性嬰兒腹股溝疝、面容粗笨、骨骼異常、運(yùn)動受限和全身性肌張力低下等。但在新生兒期一般不能做出診斷。大約在出生后6個月，嬰兒的身長可在正常范圍內(nèi)，但有全身性肌張力低，不能在床上滾動，頭支撐不良和許多外觀異常，部分病例可有重度智力低下。

面容呈進(jìn)行性粗笨，前額高，內(nèi)眥有贅皮，眼瞼肥厚，鼻梁扁平，鼻口上翻，齒齦增生。角膜清晰，但經(jīng)裂隙燈檢查可發(fā)現(xiàn)有細(xì)微的彌漫性基質(zhì)異常?；純罕翘樵黾?，可反反復(fù)生呼吸道感染、肺炎和中耳炎。關(guān)節(jié)運(yùn)動受限，并有攣縮。皮膚緊而增厚，腹部膨隆，肝臟增大。運(yùn)動遲鈍。一般在一歲以后可出現(xiàn)心臟收縮期雜音、短頸、胸廓畸形及小頭畸形等。
 

無特殊療法?；螄?yán)重者應(yīng)予手術(shù)矯形。對感染和心力衰竭的病人，應(yīng)進(jìn)行對癥處理。

飲食保健

根據(jù)不同的癥狀，有不同情況的飲食要求，針對具體的病癥制定不同的飲食標(biāo)準(zhǔn)。
 

1.一級預(yù)防  遺傳病的預(yù)防，除了從整個人群的角度做好流行病學(xué)調(diào)查、攜帶者檢出、進(jìn)行人群遺傳監(jiān)護(hù)和環(huán)境監(jiān)護(hù)、開展婚姻和生育指導(dǎo)、努力降低人群中遺傳病發(fā)生率、提高人口素質(zhì)之外，針對個體，必須采取有效的預(yù)防措施，避免遺傳病后代的出生(即實(shí)行優(yōu)生)和遺傳變異的發(fā)生，采取通常的措施包括：婚前檢查、遺傳咨詢、產(chǎn)前檢查和遺傳病的早期治療。

(1)婚前檢查：婚前檢查(即婚姻保健)，它是盡力做到男女雙方婚后生活幸福、后代健康的重要環(huán)節(jié)?；榍皺z查的重點(diǎn)是：①遺傳病方面的調(diào)查，包括詳細(xì)詢問男女雙方及其家庭成員的健康狀況，既往病史及醫(yī)治情況，尤其是有無先天畸形，遺傳病史和近親婚配史。必要時應(yīng)進(jìn)行家系調(diào)查、血型檢查、染色體檢查或基因診斷，以檢出攜帶者；②更多的體格檢查，主要是對急性傳染病，結(jié)核病，或嚴(yán)重的心、肝、腎疾病，泌尿道慢性炎癥等可嚴(yán)重威脅個人或配偶健康的疾病，以及女方的嚴(yán)重貧血、糖尿病等可對胎兒造成影響的疾病的檢出，并動員經(jīng)治好后才可結(jié)婚；③對男女生殖器官的檢查，檢出性器官畸形，兩性畸形等疾患，以便極早采取措施。

(2)遺傳咨詢：遺傳咨詢(genetic counselling)是由臨床醫(yī)生和遺傳學(xué)上，作肯定解答，遺傳病患者及其親屬提出的有關(guān)遺傳性疾病的病因、遺傳方式、診斷、治療及預(yù)后等問題，估計(jì)患者的子女再患某病的概率，并提出建議及指導(dǎo)，以供患者及其親屬參考。遺傳咨詢的意義在于：①減輕患者身體和精神上的痛苦，減輕患者及其親屬的心理壓力，幫助他們正確對待遺傳病、了解發(fā)病概率，采取正確的預(yù)防、治療措施；②降低人群遺傳病的發(fā)生率，降低有害基因的頻率，及減少傳遞機(jī)會。

2.遺傳病治療中總的原則是禁其所忌，去其所余，補(bǔ)其所缺，調(diào)節(jié)代謝平衡，防止癥狀的出現(xiàn)。

(1)糾正代謝紊亂：這是目前治療遺傳性代謝病的賊主要方法，隨著對遺傳性代謝病發(fā)病機(jī)制和中間過程的認(rèn)識不斷深化，此法的適用范圍也日益擴(kuò)大。

①飲食控制(禁其所忌)：當(dāng)代謝異常造成機(jī)體某些必需物質(zhì)缺乏時，通過飲食加以補(bǔ)充；而當(dāng)代謝物質(zhì)發(fā)生貯積時，則限制此代謝物或其前身物質(zhì)的攝入，來維持平衡。苯酮尿癥患者低苯丙氨酸飲食就是很好的范例。另外，還可通過限制對特定物質(zhì)的吸收來減少攝入，如苯酮尿癥患者服用苯丙氨酸氨基水解酶膠囊，可以將食物中的苯丙氨酸轉(zhuǎn)化為轉(zhuǎn)苯丙烯酸，而被消除。

②減少底物(去其所余)：因代謝產(chǎn)生有害物質(zhì)而引起疾病時，可以通過降低有害底物和減少其前身物質(zhì)及代謝衍生物的濃度，去除或減少其毒性作用來控制或改善疾病的癥狀。主要方法有：A.螯合或促進(jìn)排泄；B.血漿置換法和親和結(jié)合法；C.改變代謝途徑；D.外科旁路手術(shù)；E.代謝抑制。

③產(chǎn)物替代(補(bǔ)其所缺)：當(dāng)重要的酶促反應(yīng)產(chǎn)物不足而致病時，可直接補(bǔ)充相應(yīng)的必需的終產(chǎn)物。如給垂體性侏儒患者以生長激素，給血友病患者以抗血友病蛋白(凝血因子)，給遺傳性免疫缺陷病人以相應(yīng)的免疫球蛋白。

(2)糾正酶活性異常：

①輔酶的補(bǔ)充：有些遺傳病，酶活性異?？赡芾奂埃?/p>

A.一種特異性輔酶或維生素的結(jié)合部位。

B.有活性的輔酶轉(zhuǎn)運(yùn)或生物合成過程，導(dǎo)致異常。許多輔酶是全酶正?；钚运匦璧?。所以補(bǔ)充輔酶成分也是誘導(dǎo)酶活性增加的一種有效方法，它可以使全酶在細(xì)胞內(nèi)降解速度減慢，提高酶的半衰期，還可降低酶促反應(yīng)的米氏常數(shù)(Km)，目前已用此方法治療25種以上的遺傳病。如用鈷胺素(B12)治療多種貧血和甲基丙二酸尿癥等。

②酶誘導(dǎo)或反饋抑制：對酶缺陷水平的另一種療法是用藥物來提高殘余酶活性以改善代謝水平。例如苯巴比妥和有關(guān)藥物能明顯刺激滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的生成，并能加速內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中特異性酶合成，包括肝UDP葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶，為用苯巴比妥治療Gibert綜合征和Crigler-Najjar綜合征提供了理論基礎(chǔ)。

反饋抑制作用是許多代謝調(diào)節(jié)中的重要形式，針對因某種酶缺陷引起的底物或其前體堆積，可以通過其他旁路代謝的反饋抑制作用來提高酶活性，減少堆積的底物，反饋抑制已作為治療急性卟啉癥的一種方法。

③同種移植：通過向遺傳病個體植入同種含正常基因的細(xì)胞，組織或器官，以期在受體內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)的有活性的酶及其他基因產(chǎn)物，達(dá)到治療目的。移植物在受體內(nèi)可能通過兩種機(jī)制發(fā)揮作用：

A.產(chǎn)生活性酶，在原位代謝除去原來的貯積底物。

B.釋放活性酶、輔酶或免疫活性因子入血，分布到全身其他組織中發(fā)揮作用。至今已進(jìn)行過此類同種移植的組織器官有：腎、肝、腎上腺、骨髓、胸腺、脾、胰等，有的已取得明顯療效。

④酶替代療法：直接給酶缺陷患者提供相應(yīng)的正常的酶。隨著酶學(xué)技術(shù)和細(xì)胞工程、基因工程技術(shù)的發(fā)展，已經(jīng)可以提供足量的、高純度的酶制劑。這種酶制劑必須具有半衰期長、抗原性低、導(dǎo)向性好等特性。為此常采用的方法是：

A.采用微囊、脂質(zhì)體、紅細(xì)胞影泡等載體來包裝酶制劑，以減小免疫原性，延長半衰期。

B.應(yīng)用受體介導(dǎo)分子識別法來提高導(dǎo)向性。

C.對一些溶酶體貯積病，因其沉積物可以彌散入血，并保持動態(tài)平衡，則可用“平衡-去除”法來治療。

(3)基因治療：基因治療是指運(yùn)用基因轉(zhuǎn)移技術(shù)直接將遺傳物質(zhì)導(dǎo)入生殖細(xì)胞或體細(xì)胞以起到對遺傳病及其他疾病的治療作用的新型治療方法。對遺傳病進(jìn)行基因治療可望從根本上糾正遺傳病的表型異常。

①基因治療的基本策略：近十余年來，基因治療研究蒸蒸日上，提出了許多新思路、新設(shè)想，目前主要的策略有：

A.基因的原位修正(correction)和原位替代(replacement)，這一策略的目的就是要將突變的基因在原位修復(fù)，而不影響其周圍其他基因的結(jié)構(gòu)和功能。其中原位修正針對基因的點(diǎn)突變或小范圍變異，擬通過特定方法對其定點(diǎn)修復(fù)。而原位替代，就想把有較大范圍變異的基因去除而換之以正常的基因。這一策略是賊理想、賊直接的對遺傳變異進(jìn)行治好的方法，目前研究很多的哺乳動物細(xì)胞內(nèi)定點(diǎn)整合(同源重組)，給這種策略提供了理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但至今未能真正用于人體試驗(yàn)。

B.基因增強(qiáng)(gene augmentation或gene complementation)，在不改變?nèi)毕莼虮旧淼那疤嵯?，將外源有功能的基因轉(zhuǎn)移到疾病細(xì)胞或個體基因組內(nèi)，使其表達(dá)以補(bǔ)償有病基因失去的功能。此策略是目前研究賊多，也是賊成熟的方法。

C.將反義基因或其他對抗異常基因表達(dá)產(chǎn)物的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，起到抑制作用，或稱基因抑制療法(gene inhibition therapy)或細(xì)胞內(nèi)免疫(intercellular immunity)。

②基因治療的技術(shù)要點(diǎn)在基因治療的諸多策略中研究賊多、賊成熟并應(yīng)用于臨床試驗(yàn)的是基因增強(qiáng)的策略。整個研究過程通常包括臨床前研究和臨床研究(表1)。

A.疾病的選擇：目前基因治療優(yōu)選的是單基因缺陷性疾病。
 

黏脂貯積癥的病因是常染色體隱性遺傳。
 

本型黏脂貯積癥需與其他型黏脂貯積癥相鑒別。

檢查方法

實(shí)驗(yàn)室檢查：

尿中無過多的酸性黏多糖排出。培養(yǎng)的皮膚成纖維細(xì)胞及各種組織內(nèi)有包涵體，溶酶體內(nèi)有多種酶缺陷，如β-半乳糖苷酸酶，N-乙酰-半乳糖胺酶、β-葡萄糖胺酶、芳基硫酯酶、巖藻糖苷酶等，而血清中這些酶的活性增高。電鏡檢查可見溶酶體腫脹。其內(nèi)充以有包膜的致密物質(zhì)。

其他輔助檢查：

X線檢查：X線表現(xiàn)為多發(fā)性骨發(fā)育不良。早期幼兒有明顯的骨膜新骨形成，這種改變尤以股骨和肱骨的骨干周圍為顯著。在兩歲以內(nèi)，骨發(fā)育不良可呈進(jìn)行性加重。到兩歲時，上肢長管骨粗短。髂骨發(fā)育不全，髖臼變淺，脊柱改變以下胸椎和上腰椎處為著，椎突短而圓，呈鳥嘴狀?？砂l(fā)生明顯的胸腰部駝背。肋骨呈船槳狀。掌骨不規(guī)整，增寬，呈圓錐樣，指骨呈子彈狀。顱骨增厚?？捎行呐K擴(kuò)大及肺部感染征象。并發(fā)癥

嬰兒可并發(fā)先天性髖關(guān)節(jié)脫位、男性嬰兒可并發(fā)腹股溝疝。還可并發(fā)肝臟增大。一歲以后可出現(xiàn)心臟收縮期雜音、短頸、胸廓畸形及小頭畸形等。
 

預(yù)后不良，通常在2～8歲內(nèi)死亡，多死于感染和心力衰竭。
 

本癥是由多種水解酶缺陷引起的，利用病人成纖維細(xì)胞混合培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，此癥的基本生化缺陷是幾種溶酶體酶的識別部位異常。溶酶體酶的正常組合需要細(xì)胞內(nèi)的協(xié)同作用，即細(xì)胞合成、分泌水解酶，細(xì)胞表面識別水解酶，繼之被溶酶體攝取，并固定于溶酶體內(nèi)。細(xì)胞表面識別水解酶，需要在細(xì)胞表面和溶酶體水解酶上都有特異性部位。目前認(rèn)為黏脂貯積癥Ⅱ型系基因突變引起的幾種溶酶體酶發(fā)生識別部位缺損，也就是酶分子結(jié)構(gòu)中的識別亞基異常所致。

Strecker等(1976)發(fā)現(xiàn)此癥病人組織細(xì)胞神經(jīng)氨酸酶缺乏，可能該種酶缺乏與多種溶酶體水解酶的識別部位異常有關(guān)，如己糖苷酶、β-葡萄糖苷酸酶、β-半乳糖苷酸酶等的識別部位缺損，造成過多的中性、酸性黏多糖及黏脂沉積于組織細(xì)胞內(nèi)而致病。

病理：組織學(xué)改變主要限于間質(zhì)細(xì)胞。肝組織活檢顯示大多數(shù)庫普弗細(xì)胞形態(tài)正常，而肝細(xì)胞內(nèi)充有各種類型的包涵體，可含有無包膜的脂肪小滴，也有0.7～50μm的包涵體，這些包涵體表現(xiàn)為不同程度的長方形結(jié)晶，并位于微絲物質(zhì)內(nèi)，微絲物質(zhì)外包有一層膜。肝細(xì)胞內(nèi)賊多的一種包涵體含有親水物質(zhì)，該物質(zhì)具有成層結(jié)構(gòu)或呈小球狀。腎臟的包(Bowan)氏囊細(xì)胞顯示有類似肝細(xì)胞所存有的包涵體，其大小為0.3～4.0μm，PAS染色呈陽性。腦組織的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞在顯微鏡下顯示正常，但在電子顯微鏡下可見神經(jīng)元、星狀細(xì)胞和血管周圍上皮細(xì)胞有0.3～1.5μm的透明包涵體，周圍有包膜空泡，空泡內(nèi)有均勻而細(xì)小的顆?；|(zhì)，這種基質(zhì)含有少量的成層結(jié)構(gòu)，還有較致密的、周圍有包膜的親水包涵體。髂骨嵴活檢顯示軟骨細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有大量溶酶體，溶酶體內(nèi)含有細(xì)小、網(wǎng)狀、顆粒狀及有膜的包涵體。組織化學(xué)染色顯示包涵體內(nèi)沉積有中性、酸性黏多糖和黏脂。顯微鏡檢查可發(fā)現(xiàn)軟骨內(nèi)骨化明顯障礙，伴有有效性增生、肥大性軟骨脫鈣區(qū)。原有的骨小梁短，近骨干處混有持續(xù)存在的軟骨區(qū)。所有器官的成纖維細(xì)胞內(nèi)均含有大量周圍有包膜的空泡，從而使成纖維細(xì)胞呈明顯的氣球樣。周圍淋巴細(xì)胞也可有多數(shù)大空泡。所有器官成纖維細(xì)胞內(nèi)的包涵體均為多形性，從透明空泡到致密親水小體或成層排列不等。