【佳學(xué)基因檢測】基因檢測技術(shù)大全：雙脫氧DNA測序技術(shù)

基因測序技術(shù)是當(dāng)今賊熱門的分子診斷技術(shù)之一，它通過獲取盡可能多的核酸序列，并對其所能帶來的價值進(jìn)行分析，基因測序技術(shù)一定發(fā)展到第四代。

第一代測序技術(shù)是傳統(tǒng)的DNA一代測序技術(shù)以Sanger雙脫氧末端終止法為代表。該方法通過凝膠電泳區(qū)分長度不同的DNA片段，從而判斷堿基排列情況。一代測序技術(shù)在遺傳病致病基因的克隆、遺傳病的基因診斷、人類基因組計劃的實施等方面起到了重要作用，目前仍是判定測序結(jié)果正確性的金標(biāo)準(zhǔn)。由于存在較長時間的電泳環(huán)節(jié)，測序效率低，數(shù)據(jù)產(chǎn)率低。以此為基礎(chǔ)的測序儀器被個別公司壟斷。

以Sanger為基礎(chǔ)開發(fā)的第一代測序儀器的核心技術(shù)有三個：一是酶法合成DNA，二是標(biāo)記末端核苷酸的終止；三是用凝膠電泳的方法將新合成的核苷酸鏈按合成終止時的長度分開；四、是實現(xiàn)分離后檢測DNA片段?；诿?xì)管電泳的全自動桑格法測序儀由于讀取長度、通量、正確度等優(yōu)點(diǎn)，目前仍有一定的市場，多用于序列驗證(不同方法)、法醫(yī)鑒定(更正確)等。這種儀器市場的長遠(yuǎn)發(fā)展，要看二代測序儀的技術(shù)優(yōu)勢能否全面顛覆，以及儀器制造商是否盈利。

這一代測序原理很簡單清楚，通過鏈?zhǔn)浇K止法來讀取序列信息(想知道怎么測的自己百度sanger測序)。我估計這個東西的成本不高，我們在實驗室送公司的外包測序一次反應(yīng)10塊錢測800bp，一次刨除人力成本我不知道還剩幾塊錢。并且這款很好，市場上各種阿貓阿狗公司都會來推銷他們的排序服務(wù)。

這種分析技術(shù)是分子生物學(xué)的重要基礎(chǔ)技術(shù)。ABI公司的序列儀為例，用4種熒光染料對端子和引物進(jìn)行標(biāo)記，并用Sanger測序反應(yīng)得到不同的熒光標(biāo)記。每個樣本的4個測序反應(yīng)產(chǎn)物都可以在同一泳道內(nèi)電泳，從而減少不同測序泳道間遷移率的差異對正確度的影響。同時，采用同步掃描技術(shù)對各熒光標(biāo)記片段進(jìn)行電泳分離，激發(fā)熒光經(jīng)光柵分光，識別不同堿基信息的不同顏色熒光，并在CCD照相機(jī)上同步成像。計算機(jī)可以在電泳過程中同步檢測儀器的運(yùn)行狀態(tài)，并能以電泳、熒光吸收峰圖、堿基的排列次序等方式輸出。這是一種測序技術(shù)的基本原理。

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