【佳學(xué)基因檢測(cè)】基因檢測(cè)測(cè)序技術(shù)金標(biāo)準(zhǔn)：Sanger法一代測(cè)序

基因測(cè)序技術(shù)始于1977年，sanger發(fā)明的DNA雙脫氧末端終止測(cè)序法拉開(kāi)了序幕。Sanger在1958年和1980年因?yàn)橐葝u素測(cè)序和DNA測(cè)序而兩度獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)，是第四位兩度獲得諾貝爾獎(jiǎng)以及少有獲得兩次諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的人。

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Sanger測(cè)序

Sanger測(cè)序采用四個(gè)雙脫氧核糖核酸(ddNTP)加入到正在合成的鏈上，由于雙脫氧核糖核酸少了一個(gè)氧原子，一旦被加入到DNA鏈上，反應(yīng)即終止。

通過(guò)構(gòu)建四個(gè)反應(yīng)體系，加入AGCT四種雙脫氧核糖核酸，同時(shí)調(diào)節(jié)脫氧核糖核酸(dNTP)和ddNTP的相對(duì)濃度，可以使反應(yīng)擴(kuò)增得到幾百至上千堿基的終止產(chǎn)物。

隨后通過(guò)凝膠電泳對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分離，分為四個(gè)泳道，每個(gè)泳道對(duì)應(yīng)一種堿基，然后讀取條帶顯影結(jié)果。

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該方法因正確率高，被稱為基因檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，但是耗時(shí)長(zhǎng)，成本高。

2001年人類基因組計(jì)劃就是采用sanger測(cè)序完成的，從1990年人類基因組計(jì)劃建立開(kāi)始，全球的科學(xué)家歷時(shí)11年耗資30億美元完成。

進(jìn)入21世紀(jì)后，隨著物理及化學(xué)技術(shù)的發(fā)展，開(kāi)始采用相同激發(fā)波長(zhǎng)但不同發(fā)射波長(zhǎng)的熒光集團(tuán)來(lái)標(biāo)記ddNTP，ATGC對(duì)應(yīng)不同的熒光基團(tuán)產(chǎn)生不同顏色的光被計(jì)算機(jī)讀取，測(cè)序的速度和效率大大提高。